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近年來，酶標儀的功能逐漸增多，應用領域也不斷得到拓展。其中常見的多功能酶標儀為具有光吸收（ABS），熒光強度（FL）和化學發光（LUM）基礎三功能酶標儀，光吸收主要用于檢測OD值，包括Elisa，酶活，酶動力學，OD600等，熒光與化學發光則檢測的是熒光強度。

那熒光與化學發光有什么區別呢，什么實驗該用熒光檢測，什么又該用化學發光檢測呢？

首先，熒光是被激發后，酶標儀檢測發射光的熒光強度，例如，熒光染料Hoechst，PI，Calcien AM等以及熒光報告基因GFP，RFP等；化學發光是指通過化學反應或生物化學反應發出的可見光，與熒光相比不需要激發光，所以具有更低的背景。

熒光原理：熒光是短波長的光激發，電子從基態躍遷至激發態，激發態不穩定，電子需要重新回到基態，這時損失的一部分能量，會以熒光的形式呈現。

熒光檢測原理

化學發光原理：按原理可以分為兩類，其中一類為化學反應發光，常見是魯米諾的反應發光，另外一類為生物化學發光，例如螢火蟲熒光素酶，海腎熒光素酶。

化學發光檢測原理

下面我們來看一下熒光與化學發光都有哪些應用？

一. 熒光

1. 細胞活力，毒性檢測方法

實驗原理：熒光強度與活細胞數成正比、靈敏度高、特異性好、組合成復合熒光染料使用。例如：根據細胞膜完整性差異，熒光染料（Calcein AM，EthD-III）對活細胞/死細胞的穿透特性不同，對其進行特異性標記，有常規熒光染料也有優化試劑盒。

2. 活細胞中熒光蛋白的表達

熒光蛋白在監測生物體內研究中，起到越來越重要的作用，隨著時間的推移，目前可以使用的熒光蛋白的種類也越來越豐富。他們都可以在眾多細胞和組織中被克隆復制，穩定且毒性小，不需額外輔助也可在體內產生熒光。

例如：GFP報告基因是一種同時編碼GFP和靶標序列的基因， 把GFP的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因，或與其它目的基因相融合，在調控序列控制下進行表達，通過檢測GFP的熒光強弱來標定目的基因的表達調控

二．化學發光

1.  雙熒光素酶報告基因

報告基因一般用來研究真核生物的基因表達，在雙報告基因實驗中，細胞需轉染兩種質粒，一種含有目的基因調控的啟動子，另一種包含一個質控基因的組成型啟動子，將兩個報告基因共轉染，可以更好的減小實驗誤差。

Promega的雙報告基因實驗（DLR）允許使用者在一個微孔板中分別檢測螢火蟲和海腎熒光素酶，其中螢火蟲作為報告基因，海腎作為質控基因，分別進行兩次化學發光讀數。

2. 魯米諾試劑—化學發光

ELISA化學發光夾心法試劑盒QuantiGlo luminescent ELISA (R&D Systems) ，通過化學反應產生熒光，可以用來檢測人類VEGF，內皮素-1，IL-6，IL-8，IL-1，IL-2，TNF-alpha等。